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人受體ELISA試劑盒基于什么原理工作?

 更新時間:2024-12-11 點擊量:476
  人受體ELISA試劑盒是一種用于檢測受體蛋白在樣本中含量的試劑盒,其基于ELISA(酶聯免疫吸附實驗)原理工作。ELISA是一種常用的免疫學實驗技術,通過特異性抗體的結合來檢測目標蛋白或分子在樣本中的含量,其原理包括固相抗原-抗體結合、酶標記的二抗結合和底物顯色三個主要步驟。
 
  首先,人受體ELISA試劑盒中的微孔板表面涂覆有特定的抗受體抗體,這些抗體可以與待檢測樣本中的受體蛋白結合。樣本被加入到微孔板中,受體蛋白會與固相抗體結合,形成受體-抗體復合物。經過洗滌步驟后,非特異性結合的物質被洗掉,只有與抗體結合的受體蛋白殘留在微孔板中。
 

人受體ELISA試劑盒

 

  接下來,加入酶標記的二抗,該二抗能夠與受體蛋白結合并形成二抗-受體復合物。這種二抗通常是與酶如辣根過氧化物酶(HRP)結合的二抗,當二抗與受體蛋白結合后,會在微孔板中形成受體-二抗-HRP復合物。再次進行洗滌步驟,將未結合的二抗排除。
 
  最后,加入底物,底物被酶催化分解產生顯色產物。通常使用的底物是TMB(3,3',5,5'-四甲基聯苯胺),其在酶作用下生成藍色產物。在反應結束后,加入停止液,停止酶的反應,并使顯色產物由藍色轉變為黃色。
 
  最終,通過測量微孔板中產生的黃色產物的吸光度,可以間接反映受體蛋白在樣本中的含量。根據標準曲線,可以計算出待檢測樣本中受體蛋白的濃度。人受體ELISA試劑盒通過這種原理,可以快速、準確地檢測樣本中受體蛋白的含量,廣泛應用于生物醫學研究和臨床診斷中。




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